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7-27HPLC液相色譜儀作為現(xiàn)代分析化學(xué)的核心工具,通過高壓驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相實(shí)現(xiàn)復(fù)雜混合物的高效分離與精準(zhǔn)檢測。其系統(tǒng)由溶劑輸送、進(jìn)樣、分離、檢測及數(shù)據(jù)處理五大模塊構(gòu)成,每個(gè)環(huán)節(jié)的精密設(shè)計(jì)共同支撐起分析結(jié)果的可靠性。一、HPLC液相色譜儀核心構(gòu)造解析1.溶劑輸送系統(tǒng):儲(chǔ)液器采用耐腐蝕材料,內(nèi)...
高效液相色譜是將氣相色譜與經(jīng)典液相色譜相結(jié)合發(fā)展起來的新型的分離、分析技術(shù)。具有分離技術(shù)效能高、檢測靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)。它在醫(yī)藥、環(huán)境保護(hù)、食品工業(yè)、農(nóng)業(yè)、石化等領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜儀是利用混合物中各組份在不同的兩相中溶解,分配,吸附等作用性能的差異,當(dāng)兩相作相對運(yùn)動(dòng)時(shí),使各組分在兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合,實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。兩相中有一相是固定的,叫做固定相,即色譜...
在高效液相色譜使用過程中,經(jīng)常會(huì)遇到一些操作及維護(hù)問題,為使HPLC系統(tǒng)良好運(yùn)行,其中一個(gè)很重要的事情就是保持系統(tǒng)的清潔。因此,應(yīng)關(guān)注流動(dòng)相流經(jīng)該系統(tǒng)的所有地方,對于這些地方經(jīng)常性的沖洗。1、流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶首先要經(jīng)常清洗流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶,或者每做一批新樣品更換一次流動(dòng)相。一個(gè)臟的儲(chǔ)液瓶將會(huì)污染注入的流動(dòng)相。建議儲(chǔ)液瓶中緩沖液使用時(shí)間不要超過一周,而有機(jī)溶劑使用時(shí)間不要超過一個(gè)月。也有人建議儲(chǔ)液瓶中保持用溶劑充滿,直到更換分析方法儲(chǔ)液瓶需更換新溶劑(流動(dòng)相組成發(fā)生變化)時(shí),將舊溶劑倒...
液相色譜儀檢測器根據(jù)適用范圍可以分為:專用型檢測器和通用型檢測器。專用型檢測器用以測量被分離試樣樣品組分某種特性的變化,專用型檢測器對樣品中組分的某種化學(xué)或物理性質(zhì)特別敏感,而這一性質(zhì)也是流動(dòng)相所不具備的或至少在操作條件下不能顯示出來的。專用型檢測器靈敏度高,受外界環(huán)境影響和操作條件變化小,并且可用于色譜儀的梯度洗脫操作。但總體性能與通用型檢測器相比,其應(yīng)用范圍會(huì)受到一定的限制。通用型檢測器可連續(xù)測量色譜柱的流出物包括流動(dòng)相和試樣樣品組分的全部特性變化,通常一般會(huì)采用差分測量...
高效液相色譜儀是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它是由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。目前可廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。下面我們就來了解一下高效液相色譜儀的操作方法!高效液相色譜儀的操作步驟:1、過濾流動(dòng)相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜(0.45um)。2、對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。3、打開HPLC工作站,連接好流動(dòng)相管道,連接檢測系統(tǒng)。4、進(jìn)入HP...
與傳統(tǒng)的高效液相色譜(HPLC)相比,超高效液相色譜(ultra-performanceliquidchromatography,UPLC)具有高分離度(ultraresolution)、高速度(ultraspeed)、高靈敏度(sensitivity)等優(yōu)勢。在全面提升HPLC的速度、靈敏度和分離度諸品質(zhì)的同時(shí),保留其原有的實(shí)用性及原理。優(yōu)勢有:(1)通過小粒徑色譜柱(UPLC色譜柱通常采用1.7μm粒徑填料,HPLC色譜柱通常采用5.0μm粒徑填料)增加單位長度內(nèi)的理論塔...
國產(chǎn)液相色譜儀是近年來發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應(yīng)用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長,為推動(dòng)該領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展作出了巨大貢獻(xiàn)。國產(chǎn)液相色譜儀通常都被認(rèn)為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動(dòng)相的多少來決定制備液相色譜,而是依據(jù)分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進(jìn)行定量和定性。制備液相的目的是對產(chǎn)品的單...
檢測器是高效液相色譜儀的核心部件,它負(fù)責(zé)把從色譜柱分離出來的各組分快速、準(zhǔn)確的檢測出來,實(shí)現(xiàn)定性、定量分析。檢測器分類:A.選擇性檢測器:組分性質(zhì)1、紫外可見吸收檢測器(UVD)紫外吸收檢測器是目前液相色譜儀中應(yīng)用廣泛的檢測器,它靈敏度高,線性范圍寬,但要求被檢測樣品組分有紫外吸收或衍生后有紫外吸收,屬于選擇性檢測器。特點(diǎn):靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,波長可選,對流動(dòng)相的流速和溫度變化不敏感,適用于梯度洗脫,對強(qiáng)吸收物質(zhì)檢測限可達(dá)10-9g/ml以下,檢測后不破壞樣品,可...
超快速液相色譜系統(tǒng)包括高壓泵、流動(dòng)相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47~4.4X10Pa,流速可調(diào)且穩(wěn)定,當(dāng)高壓流動(dòng)相通過層析柱時(shí),可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng),可加快其在柱中的移動(dòng)速度,這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動(dòng)相貯存器和梯度儀,可使流動(dòng)相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,包括改變洗脫液的極性、離子強(qiáng)度、PH值,或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)都能獲得有效分離。那么超快速液相色譜系統(tǒng)出現(xiàn)峰分叉故障應(yīng)該怎么處理呢?下面我...
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